2018年俄羅斯世界杯已塵埃落定,法國隊(duì)時(shí)隔20年后再次捧起了大力神杯。本次俄羅斯世界杯賽場精彩紛呈,讓全世界的球迷們大飽眼福。
可能大家都沒在意,每一場球賽的順利進(jìn)行,都離不開檢測人員的努力。參加本屆世界杯的736名球員,都至少接受過一次藥檢,總共超過2700次藥檢,所有樣本結(jié)果都正常,沒有出現(xiàn)陽性結(jié)果。
比賽場上備受關(guān)注的興奮劑,您對它了解有多少呢?它是如何被準(zhǔn)確無誤地被檢測出來的?
【萊克多巴胺】
萊克多巴胺是興奮劑的一種,興奮劑在英語中稱“Dope”,是國際社會(huì)對禁用藥物的一個(gè)習(xí)慣性統(tǒng)稱,興奮劑并不都具有興奮性(如利尿劑),甚至有的還具有抑制性(如β-阻斷劑)。國際奧委會(huì)已經(jīng)規(guī)定的屬于興奮劑的部分藥品有:氯三苯乙烯、硝酸甘油、皮質(zhì)類固醇、蛋白合成類固醇、諾龍、促紅細(xì)胞生成素、睪丸素、支氣管擴(kuò)張劑、蛋白合成激素、苯乙酸諾龍等。使用興奮劑,將對人的生理、心理產(chǎn)生極大的危害,使服用者心力衰竭、激動(dòng)狂躁,成年女性男性化,男子過早禿頂,前列腺炎,前列腺肥大,患糖尿病,心臟病等,嚴(yán)重?fù)p害人的身心健康。
曾經(jīng),西馬特羅、特布他林、克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、多巴胺6種β-興奮劑,一度被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物養(yǎng)殖中,現(xiàn)在新的規(guī)定則禁止所有的β-興奮劑藥物在動(dòng)物養(yǎng)殖中使用。目前,在肉類市場上,商品豬生產(chǎn)者為了高效率地生產(chǎn)出瘦肉率高、質(zhì)量好的豬肉來跟其他的動(dòng)物產(chǎn)品競爭,興奮劑的使用仍有存在。采用液相色譜法檢測動(dòng)物組織中萊克多巴胺的含量,不僅成本低,而且操作簡便、精密度高、檢出限低、回收率高、重現(xiàn)性較好。
【樣品的制備】
取試樣5~10g至50mL聚丙烯離心管中,加入4g 無水硫酸鈉(600 ℃烘2h)和10mL 乙酸乙酯-正丁醇混合液渦動(dòng)提取15s ,超聲提取10min,2500r/min離心5min ,用10mL乙酸乙酯-正丁醇混合液重復(fù)提取1次,合并乙酸乙酯-正丁醇層于50mL雞心瓶中,加入異丙醇 5mL,在(70±5)℃下旋轉(zhuǎn)蒸干。用0.04moL/L鹽酸溶液3mL分3次溶解雞心瓶中的殘?jiān)?轉(zhuǎn)移至10mL離心管中(上層沉淀可用脫脂棉過濾除去),30000r/ min離心5min,取上清液過SLS小柱(依次用5mL水、5mL 甲醇、5mL 0.04moL/L 鹽酸溶液預(yù)處理),保持流速為1mL/ min, 然后依次用5mL水、5mL甲醇淋洗小柱,真空抽干,用10mL4 %氨/甲醇溶液洗脫 ,收集洗脫液,在(50±5)℃下用氮?dú)饬鞔蹈?。?%乙酸溶液定容到1mL,過0.45μm 微孔濾膜,供液相測定。
【標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制】
精密稱取萊克多巴胺對照品25mg ,置100mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,搖勻,作為萊克多巴胺儲(chǔ)備液。精密量取萊克多巴胺儲(chǔ)備液200uL,置10mL 容量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,得萊克多巴胺工作液。分別準(zhǔn)確吸取一定量的標(biāo)準(zhǔn)工作液,用流動(dòng)相溶液稀釋,定容,配制成濃度分別為2.5、5、10、15、25ng/ mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別進(jìn)行HPLC檢測。
【色譜條件】
檢測器:熒光檢測。 激發(fā)波長:226nm,發(fā)射波長:305nm,
色譜柱:C18 色譜柱(4. 6m ×250 mm ,5μm)
流動(dòng)相:流動(dòng)相為戊烷磺酸鈉溶液[取800mL水,加20mL冰醋酸和0.87g戊烷磺酸鈉(C5H11O3SNa·H2O)混勻]∶乙腈(78∶22,V/V)
流速:1. 0mL/ min
進(jìn)樣量:20μL
柱溫:30℃
【譜圖】
【藥品檢測儀器配置】